新型冠状病毒肺炎:抗体500vip

 

血清学检测发现身体对感染的免疫反应的证据, 哪些可以提供关于当前和先前感染以及疫苗诱导的免疫反应的信息. 

有几种类型的血清学500vip可供选择. 在SARS-CoV-2的背景下, 快速诊断500vip, 酶联免疫吸附测定(elisa),  电化学发光分析法(ECLIA)和化学发光微粒免疫分析法(CMIA)已被设计用来检测特异性于刺突(S)的抗体。, 核衣壳(N), 膜(M), 以及SARS-CoV-2病毒的包膜蛋白(E). 

快速诊断500vip(RDTs) 依靠横向流动分析格式,在几分钟内返回定性(阳性或阴性)结果. 一小块血液样本放在试纸的一端, 血样中的抗体与嵌入500vip中的标记蛋白相互作用. 500vip显示彩色的线在条的末端对应于一个正数, 负, 或者是不确定的结果. rdt不能提供定量结果,表明标本中抗体的数量. 它们体积小,携带方便,可以在护理点(POC)使用. 在2019冠状病毒病的背景下, RDTs最常用来检测患者是否存在SARS-CoV-2特异性抗体(IgM和IgG).

酶联免疫吸附测定(elisa) 依赖于患者抗体与特定病毒蛋白的特异性结合, 通常在96孔板上. elisa可返回定性或定量结果,通常在实验室环境中进行. 这些500vip使用全血、血浆或血清样本. 患者样本与病毒蛋白孵育,使抗体蛋白结合. 然后,产生的抗体-蛋白质复合物暴露于第二抗体或底物,底物与复合物结合时产生颜色或荧光信号. 由此产生的信号反映了患者样本中特异性抗体的存在和/或水平. 在新型冠状病毒肺炎情况下,elisa最常用于检测患者抗体(IgM和IgG).

Electrochemiluminscence化验(ECLIA) 依靠患者血清或血浆样本中的特异性抗体与自动分析仪上反应的特异性抗原的结合. 患者的样本与特异性重组抗原孵育, one of which is labelled with a ruthenium complex; this results in antibody/antigen complexes being formed. 然后将链霉亲和素包被的微粒添加到反应孔中,使抗原/抗体复合物与此固相结合.  然后将反应混合物吸入测量槽中, where the microparticles are magnetically captured onto the surface of the electrode; any unbound substances are then removed.  在电极上施加电压,就会产生化学发光,用光电倍增管来测量. 产生的信号决定了患者样本中特异性抗体的存在和/或水平. 这些测定方法可以根据所使用的测定方法进行定性或定量的报告. 在新型冠状病毒肺炎的背景下,ECLIA最常检测总抗体(IgG和IgM)

化学发光微粒免疫分析(CMIA) 依靠患者血清或血浆中的特异性抗体与自动分析仪上的特异性抗原的反应. The patient’s sample is incubated with antigen coated paramagnetic microparticles and assay diluent; this results in the formation of antibody/antigen complexes. 洗涤循环后,第二抗体加入反应液中并孵育. 在第二次洗涤后, 将衬底添加到反应孔中,由系统光学测量所产生的化学发光反应的相对光单位. 产生的信号决定了患者样本中特异性抗体的存在和/或水平. 这些化验报告要么是定性的. 在新型冠状病毒肺炎的背景下,CMIA检测最常用于检测患者的抗体(IgG和IgM).

SARS-COV-2的基因组监测显示出一些遗传变异,可能会影响抗体检测的特异性, 对疫苗计划也有影响. 

中和试验提供了关于患者抗体授予保护性免疫能力的定量信息. 它们是血清学500vip中最耗时和最需要技能的. 用细胞培养, 活病毒, 和患者的抗体, 研究人员可以在病人样本中观察和量化能够阻断病毒复制的抗体水平. 这些检查需要病人的全血、血清或血浆样本. 因为这些500vip需要活病毒来挑战抗体, 中和试验必须在适当的生物安全级别(生物安全级别3, 或BSL-3, 或以上),需要一周或更长时间才能返回结果.

 

参考文献